บ้านจอมยุทธ [เมนูหลัก]

[ ปิด ] ⇛ หน้าบ้าน ⇛ ห้องสมุด ⇛ ห้องร้อยบุปผา ⇛ ห้องนิจนิรันดร์ ⇛ หอพระไตร ⇛ สะพายเป้ แบกกล้อง ท่องโลก ⇛ ชุมนุมจอมยุทธ ⇛ e-book ⇛ สมุดเยี่ยม

ค้นหาข้อมูลจากบ้านจอมยุทธ คลิก!

วิทยาศาสตร์ ดาราศาสตร์ ฟิสิกส์ เคมี ชีววิทยา >>

เทคนิคทางอณูชีววิทยา

เทคนิคพื้นฐานทางอณูชีววิทยา
Electrophoresis
Paper electrophoresis และ Gel electrophoresis
การเคลื่อนย้าย DNA จากแผ่นวุ้นลงไปบนกระดาษ (DNA Blotting)
DNA Probe และ Hybridization
Restriction Endonuclease
การเพิ่มจำนวน DNA โดยวิธี PCR (Polymerase chain reaction)
เทคนิค DNA cloning
การเชื่อมต่อชิ้นส่วน DNA กับ cloning vector เพื่อให้ได้ recombinant DNA
การนำ recombinant DNA เข้าสู่ host cell (transformation)
การคัดเลือก clone ที่มี gene ที่ต้องการ
เทคนิคในการตรวจสอบ DNA (DNA identification)
เทคนิคในการหา DNA sequence
เทคนิคทางอณูชีววิทยาที่ให้ผลผลิตที่ใช้ในทางการแพทย์
หนังสืออ้างอิง

Restriction Endonuclease

โมเลกุลของ recombinant DNA (DNA สองโมเลกุลมาเชื่อมต่อกัน) จะไม่สามารถเกิดได้โดยไม่มีการใช้ restriction endonuclease (หรือ restriction enzyme) ซึ่งสามารถตัด double stranded DNA ที่ตำแหน่งของเบสที่จำเพาะ ซึ่งเรียกว่า restriction site

restriction enzyme แต่ละชนิดมีชื่อตาม organism และ strain ที่สกัดเอนไซม์ได้ เช่น BglII มาจาก Bacillus globigi, EcoRI มาจาก E. coli strain RY 13 และ HindIII มาจาก Haemophilus influenzae strain Rd. เป็นต้น

Restriction enzyme แบ่งได้เป็น 2 ชนิด คือ

Type I restriction enzyme จะตัดสายคู่ของ DNA (โดยไม่จำเพาะเจาะจงลำดับเบส) ที่อยู่ใกล้เคียงกับตำแหน่งที่มีลำดับเบสจำเพาะต่อ enzyme ชนิดนั้น เนื่องจาก Type I นี้ ตัดที่ตำแหน่งของ DNA ที่ไม่จำเพาะลำดับเบส เอนไซม์ชนิดนี้จึงไม่ค่อยเป็นประโยชน์ในทาง recombinant DNA technology เท่าใดนัก

 

Type II restriction enzyme จะตัด DNA สายคู่ที่ตำแหน่งที่มีลำดับเบสจำเพาะเจาะจง สำหรับ enzyme นั้นๆ โดยตัดภายในลำดับเบสนั้น

restriction site สำหรับ restriction enzyme type II นั้น จะมีแกนที่สมมาตร (symmetry) กันอยู่ที่จุดกึ่งกลาง ดังนั้นลำดับเบสจาก 5’ ไป 3’ ของ DNA สายหนึ่งจะเหมือนกับลำดับเบสจาก 5’ ไป 3’ ของ DNA สายที่ complement กัน ลักษณะการเรียงตัวแบบนี้เรียกว่า “palindrome”

restriction site ที่พบบ่อยจะมีจำนวนคู่เบสเป็น 4 หรือ 6 แต่ก็พบว่ามีของเอนไซม์ที่มีจำนวนเป็น 5 และ 8

restriction enzyme จะตัด DNA ที่พันธะระหว่าง 3’ carbon ของ deoxyribose sugar และ phosphate ของ deoxyribose ตัวถัดไป ดังนั้น สาย DNA ที่ถูกตัดด้วย restriction enzyme จะมี phosphate ที่ 5’ และ hydroxyl group ที่ปลาย 3’

blunt end ปลายสาย DNA เส้นคู่ที่มีลักษณะเสมอกัน ไม่มี nucleotide ใดๆ ยื่นออกมา
sticky end ปลายสาย DNA เส้นคู่ที่มีสาย DNA ที่อาจเป็นปลาย 5’ หรือ 3’ ยื่นออกมา ทำให้ปลายไม่เสมอกัน

แชร์ให้เพื่อนสิ แชร์ให้เพื่อนได้ แชร์ให้เพื่อนเลย

บ้านจอมยุทธ [เมนูหลัก]


บ้านจอมยุทธ : สร้างเมื่อ สิงหาคม 2543 วิธีใช้: อ่านเพื่อประเทืองปัญญา สรรพคุณ : แก้โง่คำแนะนำ : ควรเก็บไว้ใน Favorite หรือ ตั้งเป็นหน้าแรก | วัตถุประสงค์ |นโยบายความเป็นส่วนตัว | ติดต่อเว็บมาสเตอร์ : baanjomyut@yahoo.com : facebook